治疗白癜风的费用 https://m-mip.39.net/baidianfeng/mipso_4525518.html尽管近二十年肿瘤免疫学基础理论和临床肿瘤治疗方案、病人管理的巨大进步，然而在对胰腺癌的治疗却依旧黯然，患者的5年生存率并未取得明显进展，目前有效治疗手段仍停留在尽早诊断和手术。
当前已开展的胰腺癌临床试验所针对的特异性靶点有多个，包括：
癌胚抗原(CEA)
人表皮生长因子受体-2(HER-2)
mucin1(MUC1)
前列腺干细胞抗原(PSCA)
prominin1(PROM1)
表皮生长因子受体(EGFR)
间皮蛋白(MSN)
深度挖掘特异标记物拒绝脱靶效应
上述这些标记物蛋白均同时表达于健康细胞和癌细胞上，这也是当前新型肿瘤免疫疗法研究开发中的最大困境——靶标选择。“On-tumor,Off-target”就是肿瘤靶标非特异而导致的最直接结果，结局往往是疗效欠佳，甚至试验终结。
最近在NatureCommunication报道了利用最先进的成像技术，对胰腺导管腺癌（PDAC）患者的肿瘤切片开展了深度极高的表型分析，发现了四个胰腺癌特异性极高的标记物。通过构建基于这些靶点的CAR-T细胞，在PDX模型开展了肿瘤清除、细胞因子释放等相关功能验证和*理评估，发现TSPAN8与CD是极具转化前景的胰腺癌免疫治疗靶点组合。
全文采用了最新的研究工具，实验设计思路清晰严谨缜密，充分展示了当前肿瘤免疫学转化研究的思路架构。值得称道的是，美天旎的多位科学家参与此项研究工作并承担了大量影像数据采集和分析工作，为特异性标志物的发现贡献了卓越力量。
对具有15种代表性突变基因背景的17组胰腺导管腺癌PDX样本开展了流式分析，被测的个表面标记物中囊括了多个新型免疫疗法的在研靶点，如HER2,MUC1,PROM1和CEA。
在当前的肿瘤免疫学分析方法中，无论是单细胞层级转录组数据，还是蛋白表达谱，蛋白表达与分布的空间信息，这一重要指标往往伴随组织处理过程被丢失。因此原位图像数据采集便体现了优势，但也对成像系统的原理、蛋白标记和图像采集方法及图像分析方法提出了更高要求。
研究人员采用了自动化循环免疫荧光成像的方法，对两个PDAC肿瘤样本分别进行了和98个标记物表达和定位分析。分析如此多的标记物，目的在于充分挖掘只见于肿瘤区域而在健康组织无表达的特异性标记物，这为开发新型免疫疗法规避“On-tumor,Off-target”蓄积充分的前期数据。结合生物信息学分析结果，对所测标记物的“前景度”进行评分，评分最高的4个标记物为：CLA,TSPAN8,CD和CD66c。
构建CAR表达载体，验证靶点特异性CAR-T功能
针对识别出的四个标记物设计了具有不同spacer长度和不同scFv构象的CARlibrary，达到验证靶标特异性、同时排除由于CAR结构差异导致相应CAR-T功能不同的双重目的。这些CAR载体均为二代CAR结构，即使用CD3ζ和4-1BB做共激活结构域，使用CD8α作为跨膜结构域。
CAR-T杀伤肿瘤的功能通过检测肿瘤生长动力学获知，生物荧光信号显示为肿瘤组织。如下图结果显示，当小鼠荷瘤体积达到25mm2时给予CAR-T静脉输入，与对照组相比，CD-CAR-T细胞具有显著快速的肿瘤清除效果，TSPAN8-CAR-T细胞也具杀伤肿瘤的效果但作用较弱。
对比不同靶点特异性CAR-T在肿瘤清除效果时，我们还分析了浸润肿瘤实体内的CAR-T数量和相应细胞表型。如下图所示，尽管CD66cS-和CD-CAR-T细胞浸润入肿瘤的数量相似，但清除肿瘤效果相差甚远，再次验证了靶点的特异性。
肿瘤原位深度表型分析与MICSTechnology
本文在胰腺癌免疫疗法有效靶点发现并比对其在肿瘤组织内特异性时，使用了肿瘤标本原位深度表型分析的方法。该方法为德国美天旎开发并命名为MICSTechnology,可实现对同一样本上多达个标记物*开展表达水平、分布等多维度的分析。
进一步了解MICS原位深度表型分析技术及其在肺癌中的应用实例，欢迎收看网络讲座：Abreathoffreshairforlungcancerresearch
长按识别此
