中医对白癜风 https://m-mip.39.net/news/mipso_6136706.html本医院肝胆外科郭敬强等人开展的，人参皂苷Rg3体外抑制胰腺癌SW-细胞血管生成拟态形成的作用研究。研究表明人参皂苷Rg3能够抑sw-细胞体外血管生成拟态的形成，其机制可能与人参皂苷Rg3下调sw-细胞VE-Cadherin和EphA2表达有关。
材料与方法
01
试剂
人参皂苷Rg3标准品（纯度≥98%），鼠尾Ⅰ型胶原蛋白。VE-Cadherin抗体，EphA2抗体。
02
三维培养和PAS染色
三维模型的建立：按照说明书配成3.00mg/mL的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白。sw-细胞消化离心计数，培养基稀释使细胞密度达到5×个/mL加入每个孔。给予不同浓度（0、25、50、、μmol/L）的人参皂苷Rg3处理。其中0μmol/L为对照组，25、50、、μmol/L为用药组，培养72h后，4%中性甲醛固定，PBS和蒸馏水各洗3次，行省略苏木素染色PAS染，光学显微镜下观察、拍照。实验重复3次。
03
荧光定量PCR检测mRNA水平的VE-Cadherin和EphA2表达
根据说明用TRIzol一步法提取细胞中总的RNA。酶标仪行RNA定量。RNA上样量5μg，按照逆转录试剂盒说明合成cDNA。cDNA用DEPC水稀释3倍。扩增好的cDNA，待用的稀释引物，上机（Roche）扩增45个循环。结果使用LightCycler软件分析。
04
Westernblot检测蛋白水平的VE-Cadherin、EphA2表达
培养72h后提取蛋白。蛋白量上样40μg。配好体系的蛋白分次SDS-PAGE电泳。1×TBS平衡5min，5%的脱脂牛奶封闭2h，一抗（VE-Cadherin1∶0，EphA21∶0）4℃过夜，二抗（1∶）室温下2h，1×TBST洗涤后，加ECL化学发光曝光，结果用AlphaEaseFC4.0软件分析。
05
统计学方法
计量数据以x平均±s的形式表示，采用PSS17.0软件进行统计分析，两组间的比较进行t检验，相关性比较采用Pearson分析方法。以P0.05为差异有统计学意义。
结果
01
人参皂苷Rg3对sw-细胞血管生成拟态的作用
人参皂苷Rg3抑制sw-细胞株形成血管生成拟态，细胞经不同浓度人参皂苷Rg3处理后，管道形成的数目与人参皂苷Rg3浓度呈负相关（r=-0.，P0.05）。
（点击图片，查看大图）
02
荧光定量PCR检测VE-Cadherin和EphA2的表达
在mRNA水平，VE-Cadherin的表达量，25μmol/L组为对照组的0.91倍，50μmol/L组为对照组的0.54倍，μmol/L组为对照组的0.32倍，μmol/L组为对照组的0.23倍，各用药组与对照组差异有统计学意义（P0.05）。EphA2的表达量，25μmol/L组为对照组的0.60倍，50μmol/L组为对照组的0.39倍，μmol/L组为对照组的0.13倍，μmol/L组为对照组的0.09倍，用药组与对照组比较差异有统计学意义（P0.05）。
（点击图片，查看大图）
03
Westernblot检测VE-Cadherin和EphA2的表达
VE-Cadherin在对照组、25μm/L组、50μm/L组、μm/L组、μm/L组分别是（8.52±0.36）、（6.92±0.54）、（6.02±0.0.29）、（4.54±0.37）、（3.75±0.19），各用药组与对照组差异均有统计学意义（P0.05）；EphA2表达在对照组、25μm/L组、50μm/L组、μm/L、μm/L组分别是（11.16±0.21）、（8.53±0.42）（7.04±0.67）、（5.27±0.19）、（4.02±0.53），各用药组与对照组比较差异均有统计学意义（P0.05）。
（点击图片，查看大图）
讨论
人参皂苷Rg3能够抑制胰腺癌sw-在体外形成血管生成拟态，可能与抑制VE-Cadherin,EphA2的表达有关，但详细的分子机制有待进一步研究阐明。
本文文献来源：郭敬强,林胜璋.人参皂苷Rg3体外抑制胰腺癌sw-细胞血管生成拟态形成的作用[J].中华中医药杂志,,32(3):-.
版权声明：版权属Rg3参一胶囊所有。欢迎个人转发分享。其他任何媒体、网站如需转载或引用本网版权所有内容，须获得授权且在醒目位置注明“转自：Rg3参一胶囊”！
亚泰制药
